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分光光度计
阅读:5565时间:2011-02-26 18:40:59

  分光光度计是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的测量仪。它主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。目前,它已经成为现代分子生物实验室常规仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

特点

  1、采用高性能优质光栅,波长精度更高;

  2、采用进口钨灯,发光效率高,使用寿命长,功耗降低;

  3、超大规模集成,T/A转换精度高,稳定性高;

  4、微机系统的应用,使操作使用简单可靠。

原理

  分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

配件

  比色杯是分光光度计的重要配件,比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。

使用方法

  以722型分光光度计为例,来介绍分光光度计的使用方法:

  (1)将灵敏度旋钮调整"1"档(放大倍率最小)。

  (2)开启电源,指示灯亮,仪器预热20分钟,选择开关置于"T"

  (3)打开试样室盖(光门自动关闭),调节"0%T"旋钮,使数字显示为"00.0"。

  (4)将装有溶液的比色皿放置比色架中。

  (5)旋动仪器波长手轮,把测试所需的波长调节至刻度线处。

  (6) 盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节透过率"100%T"旋钮,使数字显示为"100.0T"(如果显示不到100%T,则可适当增加灵敏度的档数,同时应重复"3",调整仪器的"00.0")

  (7)将被测溶液置于光路中,数字表上直接读出被测溶液的透过率(T)值。

  (8)吸光度A的测量,参照"3""6"调整仪器的"00.0"和"100.0",将选择开关置于A旋动吸光度调零旋钮,使得数字显示为.000,然后移入被测溶液,显示值即为试样的吸光度A值。

  (9)浓度C的测量,选择开关由A旋至C,将已标定浓度的溶液移入光路,调节浓度按钮,使得数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值。

  (10)仪器在使用时,应常参照本操作方法中"3""6"进行调"00.0"和"100.0"的工作。

  (11)每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。

  (12)本仪器数字显示后背部,带有外接插座,可输出模拟信号,插座1脚为正,2脚为负接地线。

  (13)如果大幅度改变测试波长时,需等数分钟后才能正常工作。(因波长由长波向短波或短波向长波移动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应较慢,需一段光响应平衡时间。

技术参数

  波长范围:320∽1000nm

  光谱带宽:4nm

  杂散光:≤0.5%(在360nm处)

  波长准确度:优于±2nm

  透射比准确度:≤±1nmT

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